В офтальмологии - как разделе медицины, при достаточном технологическом оснащении в диагностике и лечении заболеваний органов зрения, невероятно слабо используются прогрессивные технологии лабораторных методов исследования.

В недавнем прошлом вполне достаточными считались простые физикальные и более сложные аппаратные методы диагностики патологии органов зрения. На сегодняшний день этого явно недостаточно. Оценка соотношения изменений в иммунной системе человека; роли ряда инфекционных заболеваний в патологии органов зрения требуют новых дополнительных методов исследования. Эти исследования способны предоставить клинике Глазных болезней технически оснащенная иммунологическая лаборатория.

Что может предложить современная лаборатория офтальмологической службе:

I. Иммунограмма - оценка состояния клеточного и гумморального иммунитета:
 
• на уровне основных показателей: определения "Т"- клеточного звена ( Хелперно- супрессорного индекса ; "В"- клеток ; естественных киллеров; циркулирующих иммунных комплексов; фагоцитарной активности нейтрофилов; уровня иммуноглобулинов классов "М", "G", "А", "Е" )
 
• на уровне более тонких показателей:
• уровня интерлейкинов различных классов
• уровня комплемента
• и др. показателей состояния иммунной системы (Прилагается стандартный бланк "Имунограммы"- оценка основных показателей иммунограммы позволяет выявить такие нарушения как:
  • Аутоиммунные заболевания.
  • Недостаточность иммунной защиты на различных уровнях иммунной системы.
  • Аллергические процессы)

И, собственно, совместно с врачом иммунологом корректировать указанные нарушения при помощи огромного арсенала иммунопрепаратов

1. Иммунодиагностика - диагностика инфекционных; онкологических заболеваний; гормональных нарушений при помощи огромного арсенала иммунологических методов:

   Немаловажную роль в патологии органа зрения играют инфекционные заболевания, такие как:

   • Герпетическая инфекция (ВПГ)
   • Аденовирусная инфекция.
   • Цитомегановирус (ЦМВ)
   • Токсоплазмоз
   • Хламидиоз (Трахома)
   • Микоплазмоз
   • Мононулеоз (Вирус Эпштейна-Барр), а так же вирусные гепатиты "В" и "С".

   Современная иммунологическая лаборатория способна оказать помощь в диагностике указанных инфекционных заболеваний, используя новейшие лабораторные методы исследования, такие как:

   • Иммунофлюоресценция в различных модификациях; Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ); Непрямая реакция иммунофлюоресценция (НРИФ)- чувствительность метода- 90-100%;Специфичность - 90- 100%
   • Выделение возбудителя инфекции методами биопробы; на питательных средах; на культуре клеток (чувствительность - 100%; специфичность-100%).
   • Иммуноферментный анализ (ИФА) - в различных модификациях (прямой, непрямой, обратный и т.д.). Чувствительность 65-70%, специфичность 90-100%.
   • Молекулярно-биологические методы:
     • Гирбридизация ДНК
     • Амплификационный метод - такой как полимеразно-цепная реакция (ПЦР). Чувствительность и специфичность приближаются к 100%.
2. Краткое описание различных лабораторных методов исследования.
   • Иммунограмма: Материал для исследования - свежевзятая гепаринизированная кровь (в стерильную пробирку с 0,5 мл физ. раствора добавить 0,02 мл стандартного раствора гепарина 4,0-5,0 мл венозной крови, перемешать; срок хранения до исследования - 3-4 часа).
   • При исследовании методом иммунофлюоресценции с моноклональными антителами определяются кластеры антигенов (CD), указывающие на принадлежность лимфоцитов к Т-клеткам (CD₃); хелперам (CD₄); супрессорами (CD₈); В-клетками (CD_20-21) и другим представителям клеточного иммунитета.
   • Методом ИФА определяются уровни глобулинов G; M; A; E.
   • Спектрометрическим методом - определяется уровень ЦИКов (циркулирующих иммунных комплексов).

• Для выявления инфекционных агентов (вирусов, риккетсий, микоплазм, бактерий, простейших) используется весь спектр иммуно-диагностическких методов ПИФ; ИФА; ПЦР.

Материалом для исследования могут быть:

1. Различные биологические жидкости (кровь, лимфа, ликвор, слезная жидкость, смывы со слизистых и др.).
2. Различные биологические субстраты и клетки (соскобы, мазки, и т.д.)

Для ПИФ - мазки со слизистых, выделения и т.п. берутся на чистое обезжиренное стекло, высушиваются на воздухе и фиксируются каплей 96% спирта. Хранение в условиях бытового холодильника до 10 дней.

Для ИФА - материал (биологическая жидкость) берется в стерильную пробирку в объеме 2-5 мл.; хранение до исследования при температуре +2°- +4°С не более 6-7 дней.

Для ПЦР - беруться соскобы; мазки; жидкости; выделения; содержимые пустул; ран и т.п., и помещаются в 0,5 мл. стерильного физ. раствора. Хранение до исследования не более 2-3 часов.

Достоинства и недостатки различных методов обнаружения возбудителей инф. заболеваний отражены на таб. №2.

Для выявления и количественного определения антител классов G;M;A к инфекционным агентам используются НРИФ и ИФА методы.

Материалом для исследования служат:

Сыворотка крови(2,0 -3,0 мл.); Ликвор и другие биологические жидкости. Срок хранения до исследования до 7 дней при температуре +2° - +4°С и более месяца при (-10°С). Методы позволяют диагностировать инфекционное заболевание на различных стадиях патологического процесса. Таб. №3.

Все выше указанные исследования могут быть проведены в Научно исследовательской лаборатории Крымского Государственного медицинского университета им. С.И. Георгиевского.